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支原体背景
细胞实验中最常见的污染之一就是支原体了。这是一种显微镜下几乎无法观察到的细菌,只有0.2-0.3μm大小,它在培养基中生长到108/ml时都不能从培养基浑浊程度或pH值上发现变化。因此支原体很难被检测到,大家也很难注意到它的存在。2013年起,SCI规定所有论文中涉及细胞的实验必须进行支原体污染检测。
支原体的影响
占用细胞养分
分泌有害代谢产物
降低细胞的增殖速率高达50%
对免疫反应产生影响
影响病毒增殖速率和病毒感染效率
引起染色体的潜在畸变
对基因芯片和基因表达谱产生变化
降低细胞转染率
干扰DNA和蛋白的分离
PCR法检测的鲜明优势
❖ 细胞上清就可以直接进行PCR反应
❖ 预混好的PCR引物——减少反应误差
❖ 能检测超过70种支原体
❖ 包含阳性对照——验证阴性结果
❖ 2小时快速得到结果
❖ 能检测出低至10拷贝的支原体